如何穩(wěn)定測(cè)量含Tris樣品的pH值?
Tris緩沖液廣泛用作核酸和蛋白質(zhì)的溶劑,Tris被用于不同 pH條件下的蛋白質(zhì)晶體生長(zhǎng)。Tris緩沖液的離子強(qiáng)度低,pH值隨溫度的變化而變化,所以應(yīng)等到樣品穩(wěn)定到室溫時(shí)再測(cè)其pH值,這樣測(cè)出來(lái)的結(jié)果比較可靠。
Tris緩沖特性
1 、Tris為弱堿,在室溫( 25℃)下,Tris 緩沖液的有效緩沖范圍在pH7.0到9.2之間。
2 、Tris堿的水溶液pH在10.5左右,一般加入鹽酸以調(diào)節(jié)pH值至所需值,即可獲得該pH值的緩沖液。
3 、三羥甲基氨基甲烷(Tris)是一種應(yīng)用非常廣泛有機(jī)試劑 ,制成緩沖溶液廣泛用作核酸和蛋白質(zhì)的溶劑及蛋白質(zhì)電泳緩沖液。
測(cè)量痛點(diǎn)
由于Tris的緩沖特性,所以在pH測(cè)量實(shí)際應(yīng)用中,常遇見(jiàn)用PHS-3C 型號(hào)類(lèi)似的?酸度計(jì)(pH計(jì))?測(cè)量 , 結(jié)果會(huì)產(chǎn)生數(shù)據(jù)漂移,常規(guī)Ag/AgCl電極的銀離子流入待測(cè)溶液中,含Tris的溶液里的成分和銀離子發(fā)生反應(yīng)生成大的分子或沉淀物,堵塞電極液絡(luò)部,測(cè)量數(shù)據(jù)產(chǎn)生漂移,無(wú)法得到正確的數(shù)據(jù)。
解決方案
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